萤火虫萤光素酶报告基因来源于（上海哈灵生物科技有限公司）
产品简介：
 (Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit)，是一种以萤光素(luciferin)为
底物来检测萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)活性的试剂盒。
 萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin。 在luciferin氧化的过程中，会发出生物萤光(bioluminescence)。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行
测定。本试剂盒的检测原理参考图1。 图1. 萤火虫萤光素酶的检测原理图。
 通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系，可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或
5'启动子区克隆在luciferase的上游，或把3'-UTR区克隆在luciferase的下游等，构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转染
细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的
转录调控作用。
 萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm (centered around 560nm)。本试剂盒可以测定100个样品

注意事项：
 为取得最佳测定效果，在用单管的化学发光仪测定时，样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内，
例如30秒内；使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好，然后统一加入萤火虫萤光素酶检
测试剂。
 由于温度对酶反应有影响，所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
 为保证萤光素酶检测试剂的稳定性，可以采取适当分装后避光保存的方法，以避免反复冻融和长时间暴露于室温。经测试，
反复冻融三次，对测定结果无明显影响。
 样品和测定试剂混合后，必须等待1-2秒，再进行测定。测定时间通常为10秒，根据情况也可以测定更长或更短时间，但是
同一批样品宜使用相同的测定时间。
 为避免由于质粒转细胞时效率的差异而带来的误差，可以同时转入海肾萤光素酶(Renilla luciferase)的报告基因质粒作为内
进行检测；也可以同时转入β-半乳糖苷酶(β-galactosidase, 
β-gal) β-半乳糖苷酶报告基因来源于（上海哈灵生物科技有限公司） 进行检测。采用本试剂盒
中的报告基因细胞裂解液裂解获得的样品可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因来源于（上海哈灵生物科技有限公司） 的检测。
 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作